PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)必須做好區(qū)域劃分，具體來說可以把PCR實(shí)驗(yàn)室劃分為4個(gè)區(qū)域，即：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
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PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域劃分 | CEIDI西遞
先來簡單介紹一下PCR實(shí)驗(yàn)室，這種實(shí)驗(yàn)室又叫“基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室”。所謂“PCR”，簡單來說就是“Polymerase Chain Reaction”的簡稱，意思是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。
PCR是一種分子生物學(xué)技術(shù)，通過這項(xiàng)技術(shù)能夠放大特定的DNA片段，就好像是生物體外的特殊DNA復(fù)制一樣。通過PCR實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)，就能夠迅速掌握待檢品中的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級別。
PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域劃分
1.試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)：此區(qū)域的作用是貯存試劑的制備、試劑的分裝、主反應(yīng)混合液的制備。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目所使用的材料，如試劑與試劑原材料，標(biāo)本與標(biāo)本原材料等，這些都必須存放于本區(qū)內(nèi)。至于是否需要控制氣流壓力，本區(qū)倒是沒有嚴(yán)格要求。
2.標(biāo)本制備區(qū)：此區(qū)域的作用是臨床標(biāo)本的保存、核酸（RNA與DNA）的提取與貯存、核酸加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時(shí)DNA的合成。注意事項(xiàng)是為了防止鄰近區(qū)域的空氣進(jìn)入本區(qū)，壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成正壓。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的操作時(shí)，工作人員要避免不必要的走動(dòng)，以防止加樣操作中發(fā)生氣溶膠污染。
3.擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)：此區(qū)域的作用是DNA擴(kuò)增、把制備的實(shí)驗(yàn)試劑做成反應(yīng)混合液。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增的污染指數(shù)比較高，壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區(qū)泄漏。
4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：此區(qū)域的作用是測定相關(guān)擴(kuò)增片段。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)時(shí)如果已經(jīng)預(yù)設(shè)了全自動(dòng)封閉分析儀器，那么就沒有必要再劃分本區(qū)了。本區(qū)的壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止擴(kuò)增產(chǎn)物擴(kuò)散至其它區(qū)域。
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)除了要做好區(qū)域劃分外，完備的配套設(shè)施也是必不可缺的。這么說吧，它是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件，但要根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容來配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈工作臺、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器等。
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2020-08-20
admin
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