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　　上海市公共衛(wèi)生臨床中心的ABSL-2實驗室自2006年正式運行至今，已具有規(guī)范、穩(wěn)定的生物安全運行體系，充分保障相關研究工作的安全開展。筆者根據(jù)多年來從事ABSL-2實驗室管理工作實際經(jīng)驗，從實驗室資質(zhì)審批及實驗申請、設施運行、人員、實驗操作管理、以及應急事件處置及防范等方面，對實驗活動管理方面的關鍵要素進行了歸納總結，供同行參考。

　　實驗室資質(zhì)審批及實驗申請

　　目前國家對ABSL-2實驗室的資質(zhì)審批，普遍采取屬地管理，通常是實驗室所在地的衛(wèi)健委或農(nóng)委主管機構負責備案管理與審批。在提交備案申請前，實驗室應取得市科委頒發(fā)的"實驗動物使用許可證”，具有動物實驗活動資格;然后將申報資料提交區(qū)衛(wèi)健委或農(nóng)委主管機構審查備案。備案通過后，ABSL-2實驗室可開展備案相關病原體的科研活動。

　　實驗開展前，科研人員向所在機構生物安全委員會遞交“ABSL-2實驗室實驗活動申請表”申請審核批準。委員會委員將參照《人間傳染的病原微生物名錄》或《動物病原微生物分類名錄》要求嚴格審核。通過對實驗計劃進行風險評估后，經(jīng)生物安全委員會批準，申請的實驗內(nèi)容才可以實施開展。此外，實驗項目開展還需要通過動物實驗倫理審查。由所在機構的動物使用和管理委員會(IACUC)依據(jù)動物保護、動物福利、動物倫理和綜合性科學評估的原則，進行嚴格監(jiān)督和評估，以盡量優(yōu)化技術線路和方法，減少實驗動物數(shù)量。

　　設施運行管理

　　ABSL-2實驗室內(nèi)的環(huán)境參數(shù)，均參照生物安全實驗室建筑技術規(guī)范和實驗室生物安全通用要求設計。實驗室內(nèi)溫濕度自動控制，通過傳感器顯示在控制器面板上并傳輸至中控室電腦系統(tǒng)，同時建立電視監(jiān)控系統(tǒng)及溫度異常報警系統(tǒng)，方便工作人員實時監(jiān)測實驗室內(nèi)溫濕度變化。照明燈具定時控制，可調(diào)光照明系統(tǒng)用于調(diào)節(jié)燈光亮度，并設定調(diào)光系統(tǒng)定時開啟、關閉時間，保證了實驗動物對光亮度的需求。送排風機組由組合式送排風系統(tǒng)組成，采用一用一備自動切換的工作模式運行，實驗室送風采用經(jīng)三級空氣過濾凈化后進入的全新風，送風和排風機制通過啟停和故障連鎖控制，此外，實驗室內(nèi)通過調(diào)節(jié)排風以維持室內(nèi)壓力和壓差穩(wěn)定。嚴格的壓力梯度控制，為了防止交叉感染，ABSL-2實驗室內(nèi)氣流必須從輔助區(qū)流向防護區(qū)，最終流入核心操作間。既保護設施，又保護實驗動物及實驗人員的安全。

　　人員管理

　　資質(zhì)管理：所有進實驗室的實驗人員，均必須接受培訓并通過考核持證上崗，包括“動物實驗上崗證”及“生物安全”雙證，既具備相關專業(yè)背景，又能熟練掌握動物實驗操作技能。

　　培訓與考核：人員培訓按崗位分類進行，以崗位職責為基礎，制定科學規(guī)范的人員培訓內(nèi)容和考核體系。在生物安全培訓方面，要制定分段式培訓計劃，從生物安全基本原理學習入手，到實驗室標準操作規(guī)范的指導性實踐訓練，再到帶教老師親自示范，一對一現(xiàn)場指導。培訓采用專題講座、知識競賽、示范練習、模擬演練等理論和實踐結合的方式。培訓結束后進行評估，評估培訓對象對培訓內(nèi)容的記憶或操作執(zhí)行情況，評估培訓對象工作中的行為變化，并建檔保存。

　　進出控制：采取嚴格的門禁授權方式，課題組項目應提前完成實驗活動危害性評估的申請審核，實驗人員接受ABSL-2實驗室內(nèi)部培訓，且經(jīng)考核合格后，才能被授權打開門禁。實驗人員進實驗室前需填寫“實驗預約登記表”并計劃好每周實驗時間，每次進入實驗室時須認真完成登記，在實驗室內(nèi)嚴格按照標準操作程序(SOP)規(guī)定的路線進行個人防護裝備的穿戴及更換。

　　健康監(jiān)測：對從業(yè)人員進行長期健康監(jiān)測，留存本底血清，進行必要的疫苗接種，每年組織體檢并建立健康檔案;及時了解工作人員的健康狀況，確保人員的職業(yè)健康和福利。

　　實驗操作管理

　　個人防護：個人防護用品(PPE)使用是控制生物安全風險的終端措施，選擇和使用合適的PPE是避免ABSL2實驗室感染的關鍵。實驗人員在ABSL-2實驗室中，按照不同傳播途徑疾病的預防，針對重點防護部位謹慎選擇合適的PPE，并掌握正確使用方法，加強個人防護。實驗室中氣溶膠傳播是實驗人員發(fā)生獲得性感染的主要途徑之一，因此特別要加強呼吸防護。

　　規(guī)范操作：實驗室制定完整的管理體系文件,包括管理手冊、程序文件、標準操作規(guī)程、安全手冊、風險評估與應急預案、記錄表單等文件，實驗操作嚴格按照體系文件要求執(zhí)行，保障各項實驗活動順利開展。

　　清場消毒：實驗結束后認真做好清場工作，所有實驗物品移出生物安全柜前都應打包入高壓滅菌袋，并用適當?shù)南緞缇砻嫦?。動物調(diào)動后的IVC籠具在生物安全柜內(nèi)放入高壓滅菌袋內(nèi)，經(jīng)表面消毒后高壓鍋滅菌，然后徹底清洗。未使用完的感染性生物材料、防護區(qū)的污染材料等高壓滅菌銷毀，如實填寫操作和處理記錄。最后，生物安全柜完成內(nèi)壁的消毒擦拭后繼續(xù)運行10min，再紫外燈消毒15 min，然后關閉。一個實驗周期后，實驗室可用過氧化氫對空間進行熏蒸滅菌消毒，48h后開啟實驗室送排風系統(tǒng)，空置1周后做沉降菌濃度檢測，后續(xù)重新投入使用。

　　應急事件處置及防范

　　預案制定、組織應急演練、緊急事件處置三個環(huán)節(jié)，是缺一不可的三個核心環(huán)節(jié)。應按照實驗活動種類、設施設備狀況、人員能力現(xiàn)狀和管理體系文件的執(zhí)行情況，制定生物安全事故應急防控預案;預案要適合本實驗室的特點，具有可操作性。每年定期安排相關人員應急演練培訓，熟悉意外發(fā)生后正確有效處置。一旦發(fā)生緊急事件，立即啟動應急處置程序：首先處理好菌毒種及感染性樣品，并做好現(xiàn)場消毒、滅菌處理，嚴防病原微生物擴散，并按照程序及時進行事故上報和處置。所有人員必須嚴格按照應急預案以及相關操作規(guī)程進行處理，以人身安全為第一原則。一旦發(fā)現(xiàn)工作人員出現(xiàn)了實驗相關病原微生物感染類似的臨床癥狀，應立即匯報實驗室主任，并向生物安全委員會及單位負責人報告，按流程啟動相關應急處理方案，同時派專人陪同及時就診。

　　展望

　　進一步強調(diào)生物安全風險評估，完善生物安全管理體系。生物安全風險評估是ABSL-2實驗室管理核心內(nèi)容，根據(jù)風險評估結果，細化安全防范制度和標準操作規(guī)程，進一步采取相應的防范措施，提高生物安全防護水平。不斷完善科學、有效的生物安全管理體系，加強生物安全管理體系運行。同時需強化動物實驗生物安全相關前沿科技的交流學習，進一步提高動物生物安全二級實驗室的保障水平;提供ABSL2共享平臺，確保相關科研活動的規(guī)范開展，為相關科研攻關任務保駕護航。
來源：未來實驗室學苑

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